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對(duì)于如何估計(jì)顯微鏡的視野,你之前了解多少呢?

返回列表 來(lái)源:本站 發(fā)布日期:2022-12-29 15:04:26【

什么是顯微鏡的視野?顯微鏡的視野(也縮寫為 FOV)是以距離為單位的可觀察區(qū)域的范圍。光學(xué)器件在圍繞光軸的視野中提供清晰且不失真的視野,視野由此選擇。在該視圖中產(chǎn)生圖像的光線通常沒(méi)有像差,并且不會(huì)造成圖像強(qiáng)度的顯著下降。

視野顯微鏡定義簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)*是您在顯微鏡下看到的特定放大倍率的區(qū)域。例如,您正在光學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)胞或標(biāo)本。你看到的圓的直徑*是顯微鏡的視野。

當(dāng)您增加放大倍率時(shí),視野會(huì)縮小。根據(jù)鏡頭系統(tǒng),這可能會(huì)有所不同。測(cè)量視野的一種粗略方法是在顯微鏡下使用尺子進(jìn)行特定放大。

要計(jì)算顯微鏡的視場(chǎng),您需要知道目鏡放大倍率、視場(chǎng)數(shù)和物鏡。獲得此信息后,您可以通過(guò)將視場(chǎng)數(shù)除以放大倍數(shù)來(lái)計(jì)算顯微鏡的視場(chǎng)。

視野公式:

視場(chǎng) = 視場(chǎng)數(shù) (FN) ÷ 物鏡放大率

當(dāng)您切換目鏡或物鏡時(shí),請(qǐng)確保使用新輸入的視場(chǎng)數(shù)和放大倍率重復(fù) FOV 計(jì)算。對(duì)于需要更高放大倍率的物體,請(qǐng)將測(cè)量值從毫米轉(zhuǎn)換為微米。

更高倍率的鏡頭可以讓您看到微小的物體,因此視角會(huì)很小;低倍鏡頭會(huì)做相反的事情,讓你看到更大(更寬)的物體。

在此處了解有關(guān)顯微鏡放大倍率的更多信息。

如果使用帶有輔助透鏡的立體顯微鏡,則該透鏡的放大倍數(shù)也應(yīng)通過(guò)與物鏡放大倍率相乘而用于方程。在除以視場(chǎng)數(shù)之前,您將目鏡放大率乘以物鏡放大率才能找到總放大率。

視野 = FN ÷(物鏡放大倍率 x 輔助鏡頭放大倍率)

光學(xué)顯微鏡.png

例如,如果您的目鏡讀數(shù)為 10X/22,而物鏡的放大倍率為 40。首先,將 10 40 相乘得到 400。然后將 22 除以 400 得到 0.055 毫米的 FOV 直徑。

為什么視野與顯微鏡相關(guān)?

顯微鏡上的視野決定了成像區(qū)域的大小。當(dāng)您想要測(cè)量密度等細(xì)節(jié)時(shí),它變得很重要——例如,估計(jì)溶液中細(xì)胞密度的實(shí)驗(yàn)。要獲得答案,您要獲取視野圖像,計(jì)算細(xì)胞數(shù)量并將其除以成像區(qū)域。結(jié)果將是細(xì)胞/微米的估計(jì)值。

請(qǐng)注意,視野的范圍取決于放大倍數(shù)。具有較高放大倍率的物鏡具有較小的視野。因此,應(yīng)根據(jù)要研究的特征的大小來(lái)選擇視野的大小。細(xì)菌比大多數(shù)人類細(xì)胞小(大約 5 微米)(大腦的星形膠質(zhì)細(xì)胞直徑可以有 90 微米)。因此,研究星形膠質(zhì)細(xì)胞需要更大的視野。

當(dāng)您將圖像記錄到數(shù)字媒體時(shí),FOV 可以表示為沿主軸的距離(例如,1 mm)或校準(zhǔn)的像素?cái)?shù)(例如,1 um/pixel 時(shí)的 1024 個(gè)像素)。

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